在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
MrNV罗氏沼虾诺达病毒ELISA试剂盒 公司产品信息:
Mouse LDL-IC ELISA试剂盒LDL-IC小鼠低密度脂蛋白免疫复合物ELISA试剂盒96T/48T
Mouse Ureaplasma urealyticum antibody,UU-Ab ELISA试剂盒 UU-Ab小鼠解脲脲原体抗体ELISA试剂盒 96T/48T
Mouse glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA试剂盒GFAP小鼠神经胶质纤维酸性蛋白ELISA试剂盒96T/48T
Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA试剂盒pANCA小鼠抗中性粒细胞核周抗体ELISA试剂盒96T/48T
Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA试剂盒 PI Ab-IgG/IgM小鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgMELISA试剂盒96T/48T
Mouse 15-lipoxygenase,15-LO/LOX ELISA试剂盒15-LO/LOX小鼠15脂加氧酶ELISA试剂盒96T/48T
Mouse Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA试剂盒 IFN-β/IFNB小鼠β干扰素ELISA试剂盒 96T/48T
Mouse Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA试剂盒Tn-Ⅰ小鼠肌钙蛋白ⅠELISA试剂盒96T/48T
Mouse Serum amyloid A,SAA ELISA试剂盒SAA小鼠血清淀粉样蛋白AELISA试剂盒96T/48T
Mouse anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA试剂盒 ACA小鼠抗中性粒/中心体抗体ELISA试剂盒 96T/48T
Human Anti-trypsin,AT ELISA试剂盒
Human anti-ribosomal P protein antibody,ARPA/Rib-P ELISA试剂盒
Human anti-ribosomal P protein antibody,ARPA/Rib-P ELISA试剂盒
Human Anti-Somatic Muscle Antibody,ASA ELISA试剂盒
Human Thyroid Antibody,TAb ELISA试剂盒
Human islet cell antibody,ICA ELISA试剂盒
Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA试剂盒
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
MrNV罗氏沼虾诺达病毒ELISA试剂盒 注意事项
1.做好对照
正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2.实验条件的选择
